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DEP-1双切口酶质粒(h) | sc-402501-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DEP-1双切口酶质粒(h2) | sc-402501-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTPRJ 编码受体型蛋白酪氨酸磷酸酶 DEP-1(CD148)。DEP-1 是一种跨膜磷酸酶,通过去除多种受体及其下游效应蛋白上的磷酸化酪氨酸残基,来对抗激酶驱动的信号传导。DEP-1 可调控细胞增殖、黏附与迁移等过程相关的通路,包括受体酪氨酸激酶下游信号以及与整合素相关的复合体信号。通过维持磷酸化稳态,PTPRJ 影响上皮与内皮细胞中的接触抑制以及细胞对生长刺激的反应。PTPRJ/DEP-1 的失调或表达改变与癌症生物学及血管/炎症研究模型中观察到的异常信号状态有关。
DEP-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PTPRJ 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PTPRJ内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PTPRJ的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PTPRJ基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。