非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
DAGLα 抗体 (E-6): sc-390409. 在 NCI-H292 (A), SK-N-MC (B), Sol8 (C), C2C12 (D), C6 (E) 和 L8 (F) 全细胞裂解液中 DAGLα 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
DAGLα CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-402826
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- DAGLα CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在DAGLα基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：DAGLα: sc-390409，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
DAGLα CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-402826 | 20 µg | $397.00 |
概述
DAGLA 编码二酰甘油脂肪酶α（DAGLα），这是一种与膜相关的丝氨酸水解酶，催化二酰甘油水解生成 2‑花生四烯酰甘油（2‑AG），后者是主要的内源性大麻素脂质介质。通过调控 2‑AG 的产生，DAGLα 影响逆行性突触信号传递、CB1 受体激活以及依赖活动的神经递质释放调节，从而将脂质代谢与神经元兴奋性和可塑性联系起来。DAGLα 的活性与磷脂酶 C–二酰甘油信号通路相互衔接，并与更广泛的花生四烯酸相关脂质网络发生交互，这些网络共同塑造炎症反应与细胞应激反应。DAGLA 依赖的内源性大麻素基调（tone）发生改变与神经发育及神经精神相关表型有关，并在癫痫、痛觉处理和代谢失调等研究情境中受到关注。
DAGLα CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中DAGLA基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对DAGLA基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏DAGLA开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使DAGLα蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建DAGLA缺失的细胞模型，用于DAGLα信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 DAGLα 功能至关重要的 DAGLA 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 DAGLA 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 DAGLα CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 DAGLα CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 DAGLA 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 DAGLα HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 DAGLα HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由DAGLA同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定DAGLA靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。