Plásmido Doble Nickase (h) cyclin G1: sc-402045-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)cyclin G1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa cyclin G1 (h) y el plásmido de doble nickasa cyclin G1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CCNG1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: cyclin G1 Anticuerpo (F-5): sc-8016
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) cyclin G1 | sc-402045-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) cyclin G1 | sc-402045-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCNG1 codifica la ciclina G1, una ciclina atípica regulada transcripcionalmente por p53 que coordina el control del ciclo celular con las respuestas celulares al estrés. La ciclina G1 participa en la regulación de los puntos de control y en la modulación de redes de fosforilación de proteínas, incluidas interacciones que influyen en la retroalimentación MDM2–p53 y en la señalización asociada a fosfatasas, como complejos vinculados a PP2A. A través de estas vías, CCNG1 afecta la proliferación, la estabilidad genómica y las respuestas al daño del ADN, lo que la hace relevante para estudios de biología tumoral, resistencia al estrés genotóxico y regulación aberrante del ciclo celular en contextos de enfermedad humana. Se han observado alteraciones en la expresión o la regulación de CCNG1 en múltiples tipos de cáncer, lo que respalda su utilidad como un nodo mecanístico para desentrañar la señalización adaptativa al estrés.
cyclin G1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CCNG1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CCNG1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CCNG1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CCNG1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.