Plásmido Doble Nickase (h) CtBP1: sc-400667-NIC

CTBP1 codifica el correpresor transcripcional CtBP1, un regulador conservado que conecta represores que se unen al ADN con complejos modificadores de la cromatina para moldear programas de expresión génica. CtBP1 participa en el control epigenético mediante interacciones con desacetilasas de histonas y otros factores de remodelación, influyendo en procesos como la diferenciación, la apoptosis y la adaptación metabólica. Como corre­gulador sensible a NAD(H), CtBP1 integra el estado redox celular con las salidas transcripcionales y contribuye a vías como Wnt/β-catenina y redes transcripcionales asociadas a TGF-β. La alteración de la actividad de CTBP1 se ha asociado con una represión transcripcional desregulada en la biología del cáncer y con fenotipos del neurodesarrollo, lo que respalda su estudio en los circuitos de regulación génica y en estados celulares relevantes para la enfermedad.

CtBP1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CTBP1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CTBP1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CTBP1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CTBP1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.