Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Cox-2: sc-400072-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Cox-2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Cox-2 (h) y el plásmido de doble nickasa Cox-2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PTGS2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Cox-2 Anticuerpo (H-3): sc-376861
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Cox-2 | sc-400072-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Cox-2 | sc-400072-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTGS2 codifica la ciclooxigenasa-2 (Cox-2), una enzima inducible asociada a membrana que convierte el ácido araquidónico en prostaglandina H2, el precursor comprometido de los prostanoides bioactivos. Cox-2 se induce rápidamente por citocinas inflamatorias, factores de crecimiento y señales de estrés, integrando programas transcripcionales vinculados a NF-κB, MAPK y AP-1 con la biosíntesis de mediadores lipídicos. A través de la señalización de prostaglandinas aguas abajo, modula el tono vascular, las interacciones plaqueta-endotelio, las respuestas de dolor y fiebre, y el reclutamiento de células inmunitarias. La expresión desregulada de PTGS2 y el flujo de prostanoides se estudian con frecuencia en la inflamación crónica, en microambientes promotores de tumores y en modelos de enfermedad metabólica o cardiovascular, donde las vías de eicosanoides determinan el estado celular y la remodelación tisular.
Cox-2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PTGS2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PTGS2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PTGS2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PTGS2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.