COL9A2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405890

Descripción general

COL9A2 codifica la cadena α2 del colágeno tipo IX, un colágeno FACIT que se asocia con las fibrillas de colágeno tipo II para estabilizar y organizar la matriz extracelular del cartílago hialino. Al contribuir a la fibrilogénesis y a las interacciones matriz–célula, COL9A2 sostiene la función de los condrocitos, la resistencia tensil del cartílago y los procesos de mecanotransducción centrales para el desarrollo esquelético y la homeostasis articular. La alteración de la expresión o de la estructura de COL9A2 se ha vinculado a trastornos hereditarios del cartílago y se ha estudiado en el contexto de fenotipos degenerativos articulares de inicio temprano y de patología del disco intervertebral. Como componente de la matriz, COL9A2 conecta la remodelación de la matriz extracelular con vías que regulan la integridad del cartílago, incluida la formación de colágeno, la organización de proteoglucanos y la señalización sensible al estrés en los condrocitos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO COL9A2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen COL9A2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del COL9A2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de COL9A2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína COL9A2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en COL9A2 para la investigación de la señalización de COL9A2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de COL9A2 críticos para la función de COL9A2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de COL9A2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido COL9A2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido COL9A2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus COL9A2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR COL9A2 (h) y el plásmido HDR COL9A2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología COL9A2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana COL9A2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.