Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
COL6A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403209
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- COL6A2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico COL6A2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:COL6A2 Anticorpo (B-7): sc-374566
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
COL6A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403209 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
COL6A2 codifica a cadeia α2 do colágeno VI, um componente microfibrilar da matriz extracelular (MEC) que se associa a COL6A1 e COL6A3 para formar filamentos com aparência de “contas” nos tecidos conjuntivos. O colágeno VI contribui para a organização da MEC, a adesão célula–matriz e a mecanotransdução, influenciando a arquitetura do citoesqueleto e vias de sinalização como integrina/FAK, MAPK e programas de remodelamento associados ao TGF-β. Por meio desses processos, COL6A2 ajuda a regular a integridade tecidual e as respostas celulares ao estresse em fibroblastos, miócitos e outros tipos de células estromais. A interrupção patogênica da montagem do colágeno VI está ligada a doenças hereditárias neuromusculares e do tecido conjuntivo, tornando COL6A2 um alvo relevante para modelar fenótipos dirigidos pela MEC.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO COL6A2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene COL6A2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do COL6A2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do COL6A2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína COL6A2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de COL6A2 para a investigação da sinalização de COL6A2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) COL6A2 críticos para a função COL6A2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos COL6A2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo COL6A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo COL6A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus COL6A2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo COL6A2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR COL6A2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia COL6A2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo COL6A2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.