Plásmido Doble Nickase (h) COL11A1: sc-403512-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)COL11A1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa COL11A1 (h) y el plásmido de doble nickasa COL11A1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a COL11A1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) COL11A1 | sc-403512-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) COL11A1 | sc-403512-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COL11A1 codifica la cadena α1 del colágeno tipo XI, un colágeno fibrilar cuantitativamente minoritario pero funcionalmente importante que se coensambla con el colágeno tipo II para regular el diámetro y el espaciado de las fibrillas de colágeno, así como sus propiedades de resistencia a la tracción, en la matriz extracelular. Es especialmente relevante para la biología del cartílago y del tejido conectivo, donde contribuye a la organización de la matriz, la diferenciación de los condrocitos y la señalización relacionada con la mecanotransducción. Las alteraciones en la expresión o en la secuencia de COL11A1 se han asociado con fenotipos de remodelación de la matriz extracelular y con trastornos del tejido conectivo, y con frecuencia se estudia en el contexto de firmas estromales y de la desmoplasia del microambiente tumoral. Como gen estructural de la MEC, COL11A1 ofrece un punto de entrada manejable para investigar vías dependientes de la matriz, incluidas la adhesión mediada por integrinas, la dinámica de las adhesiones focales y los programas de remodelación asociados a TGF-β.
COL11A1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus COL11A1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de COL11A1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de COL11A1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con COL11A1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.