Clusterin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419695

Descripción general

Mouse Clu codifica clusterina, una glucoproteína secretada y asociada a la matriz extracelular que actúa como chaperona molecular y como factor de unión a lípidos, implicada en la proteostasis, la regulación del complemento y la eliminación de detritos celulares. La clusterina participa en procesos sensibles al estrés, incluida la modulación de la apoptosis, la adaptación al estrés oxidativo y la remodelación de membranas, y se ha relacionado con vías que regulan la inflamación y la homeostasis extracelular. En el sistema nervioso y en otros tejidos, CLU se estudia con frecuencia por sus funciones en la dinámica de agregación de proteínas y en la señalización glial o inmunitaria. La desregulación de la expresión o función de CLU se ha asociado con la neurodegeneración, el estrés metabólico y la biología tumoral, lo que la convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos de lesión tisular y estados inflamatorios crónicos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Clusterin (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Clu en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Clu junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Clu tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Clusterin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Clu para la investigación de la señalización de Clusterin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Clu críticos para la función de Clusterin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Clu para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Clusterin CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Clusterin CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Clu. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Clusterin (m) y el plásmido HDR Clusterin (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Clu para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Clu definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.