CHSY3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-429749

개요

Chsy3는 콘드로이틴 황산 합성효소 3(CHSY3)을 암호화하며, CHSY3는 골지체에 존재하는 글리코실전이효소로서 프로테오글리칸에 부착된 콘드로이틴 황산 글리코사미노글리칸 사슬의 연장 과정에 관여합니다. CHSY3는 다른 콘드로이틴 중합효소 및 황산전이효소들과의 협력을 통해 세포외기질의 조직화, 성장인자의 격리, 그리고 조직의 형태형성과 항상성을 형성하는 세포–기질 신호전달에 영향을 미칩니다. 마우스 시스템에서는 콘드로이틴 황산의 조성이 변화하면 프로테오글리칸 의존성 경로를 조절함으로써 연골 및 골격 발달, 신경 가소성, 염증성 미세환경 등에 영향을 줄 수 있습니다. 따라서 Chsy3는 근골격계 및 신경생물학적 표현형 모델에서 세포외기질 리모델링과 프로테오글리칸 생물학의 기전 연구에 중요한 유전자입니다.

CHSY3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Chsy3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Chsy3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Chsy3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CHSY3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CHSY3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Chsy3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CHSY3 기능에 중요한 Chsy3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Chsy3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CHSY3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CHSY3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Chsy3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CHSY3 HDR 플라스미드 (m) 및 CHSY3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Chsy3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Chsy3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.