Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CHMP1A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406556
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CHMP1A El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CHMP1A, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CHMP1A Anticuerpo (B-5): sc-271617
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CHMP1A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406556 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CHMP1A (proteína 1A de cuerpos multivesiculares cargada) es un componente central de la maquinaria ESCRT-III, que remodela membranas para impulsar la biogénesis de cuerpos multivesiculares y la clasificación de carga endosomal dirigida a la degradación lisosomal. A través de procesos dependientes de ESCRT, CHMP1A contribuye a la disminución de receptores, a eventos de escisión de membrana y a una regulación más amplia de la proteostasis, la citocinesis y la dinámica de la envoltura nuclear. La alteración del tráfico endolisosomal asociado a CHMP1A puede modificar la duración de las vías de señalización y la homeostasis celular, vinculando la disfunción de ESCRT con fenotipos del neurodesarrollo y otros trastornos caracterizados por un tráfico de membranas deficiente. Como gen humano, CHMP1A se estudia con frecuencia en contextos en los que la maduración de endosomas y el control de la señalización mediada por vesículas son fundamentales para estados celulares relevantes para la enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CHMP1A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CHMP1A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CHMP1A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CHMP1A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CHMP1A.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CHMP1A para la investigación de la señalización de CHMP1A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CHMP1A críticos para la función de CHMP1A
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CHMP1A para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CHMP1A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CHMP1A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CHMP1A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CHMP1A (h) y el plásmido HDR CHMP1A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CHMP1A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CHMP1A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.