Plásmido Doble Nickase (m) CHD7: sc-435822-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)CHD7 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CHD7 (m) y el plásmido de doble nickasa CHD7 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Chd7. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CHD7 Anticuerpo (F-11): sc-390742
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) CHD7 | sc-435822-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) CHD7 | sc-435822-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Chd7 codifica CHD7, un remodelador de cromatina dependiente de ATP de la familia CHD que regula la accesibilidad de los potenciadores y los programas de transcripción durante el desarrollo embrionario y el patrón tisular. En células de ratón, CHD7 influye en la especificación de linajes y en las decisiones de destino celular al coordinar el posicionamiento de los nucleosomas con la unión de factores de transcripción en vías que gobiernan la cresta neural, la neurogénesis y el desarrollo de órganos sensoriales. La alteración de la función de CHD7 desorganiza la cromatina y las redes de expresión génica, por lo que se utiliza ampliamente como modelo para estudiar síndromes del desarrollo y los mecanismos de los fenotipos congénitos. CHD7 también se integra en procesos más amplios de regulación epigenética, incluida la comunicación promotor–potenciador y el control de la elongación transcripcional.
CHD7 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Chd7 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Chd7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Chd7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Chd7 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.