Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) CDKN1B/Kip1 p27: sc-419608-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)CDKN1B/Kip1 p27 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CDKN1B/Kip1 p27 (m) y el plásmido de doble nickasa CDKN1B/Kip1 p27 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Cdkn1b. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CDKN1B/Kip1 p27 Anticuerpo (F-8): sc-1641
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) CDKN1B/Kip1 p27 | sc-419608-NIC | 20 µg | $410.00 |
Cdkn1b codifica el inhibidor de quinasas dependientes de ciclina p27^Kip1 (CDKN1B), un regulador negativo clave de la progresión del ciclo celular que limita la actividad de CDK2–ciclina E/A y ayuda a mantener el punto de control G1/S. p27 integra señales mitogénicas con el control del crecimiento a través de vías que incluyen la señalización PI3K–AKT, donde la localización subcelular dependiente de fosforilación y el recambio proteasomal modulan su función inhibidora. En sistemas murinos, la alteración de la dosis o la regulación de Cdkn1b se utiliza ampliamente para estudiar el equilibrio entre proliferación y diferenciación, la homeostasis tisular y los programas de senescencia celular. La expresión o estabilidad desregulada de p27 se asocia con frecuencia a un control anómalo del ciclo celular en modelos de biología del cáncer y a fenotipos hiperproliferativos en contextos de desarrollo y regeneración.
CDKN1B/Kip1 p27 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Cdkn1b en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Cdkn1b. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Cdkn1b. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Cdkn1b alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.