Cdk9 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-400242. Western blot analysis of human Cdk9 expression in empty vector control (A) and Cdk9 CRISPR/Cas9 KO Plasmid transfected (B) HEK293T whole cell lysates. Blot probed with Cdk9 (H-1): sc-393442. β-Actin (C4): sc-47778 used as specificity and loading control.
Plásmidos CRISPR Cdk9 (h)
- Especies objetivo: human; para el producto correspondiente mouse, consulte Cdk9 CRISPR Plasmids (m)
- Los plásmidos consisten en Cdk9 una guia especifica de ARN de 20 nt, obtenida de la libreria GeCKO (v2)
- las secuencias del gRNA dirigen a la proteina Cas9 para que genere un corte de doble cadena (DSB) especificamente en el ADN del gen
- Hay disponibles plásmidos CRISPR específicos de dianas tanto para la inactivación como para la activación de genes. Consulte la información detallada del producto en las pestañas a continuación
- El knockdown y la activación génica pueden comprobarse utilizando: Cdk9 Anticuerpo (D-7): sc-13130
- Todos los productos se proporcionan listos para usar, plásmidos purificados de ADN, excepto las Partículas Lentivirales que son envasadas como Párticulas Lentivirales para usar con células dificiles de transfectar.
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CRISPR/Cas9 KO Plasmid
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Los plásmidos RISPR/Cas9 KO, Plásmidos Doble Nickase y Plásmidos de Activación CRISPR/dCas9 se consideran productos "Licensed Product" y se utilizarán de acuerdo con la Licencia/Etiqueta Limitada haga click aquí.
Description
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Cdk9 Plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) consiste en un conjunto de tres plásmidos, cada uno expresa una nucleasa Cas9 y una Cdk9- guia de RNA de 20 nt (gRNA) diseñada para aumentar la eficiencia del Knockout
- Las secuencias del gRNA provienen de la biblioteca genómica GeCKO (v2) y dirigen a la proteína Cas9 para producir la rotura de la doble cadena (DSB) en el ADN genómico (%link_11%)
- Para seleccionar las células con el corte en la doble cadena, inducido por Cas9, se recomienda la co-transfección con Cdk9 Plásmido HDR (h2) (sc-400242-HDR-2)
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Cdk9 Anticuerpo (D-7): sc-13130
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- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Cdk9 Plásmido HDR (h2) está recomendado para co -transfectar con Cdk9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2)
- Cdk9 Plásmido HDR (h2) es un conjunto de 2-3 plásmidos, cada uno contienen una una plantilla para la Reparación del ADN por Homología Dirigida (HDR) correspondientes a los cortes generados por Cdk9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2)
- Cada plantilla HDR contiene dos brazos homólogos de 800 pares de bases, diseñados para unirse específicamente al ADN genómico que rodea el corte inducido por Cas 9
- Cada plásmido HDR inserta un gen de resistencia a puromicina para permitir la selección de células con knockout (KO) y RFP (Proteína Roja Fluorescente) para verificar visualmente la transfección
- La resistencia a Puromicina y el gen RFP están flanqueados por dos sitios LoxP, para permitir un posterior procesamiento con el Cre Vector sc-418923
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- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Cdk9 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- Los ARN guía codificados en el Plásmido Doble Nickase (h2 )Cdk9 son diferentes del par codificado en Plásmido Doble Nickase (h)
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Cdk9 Anticuerpo (D-7): sc-13130
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- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmdo de Activación CRISPR (h) Cdk9 es un sistema de activación de la trascripción mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen concreto
- Los Plásmdo de Activación CRISPR (h) Cdk9 incluyen los siguientes tres plásmidos, con un radio 1:1:1 : plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada (dCas9), (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64 y el gen de resistencia a blasticidina; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y el gen de resistencia a Higromicina; plásmido codificador de la secuencia diana específica de 20 nt de ARN y el gen de resistencia a puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación genica.
- Tras la transfección, la eficacia de la activación génica puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Cdk9 Anticuerpo (D-7): sc-13130
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Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Cdk9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-400242-KO-2 | 20 µg | $397.00 | |||
Cdk9 Plásmido HDR (h2) | sc-400242-HDR-2 | 20 µg | $445.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h) Cdk9 | sc-400242-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Cdk9 | sc-400242-NIC-2 | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido CRISPR de Activación (h) Cdk9 | sc-400242-ACT | 20 µg | $397.00 |