Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CDK5RAP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407278
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CDK5RAP1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CDK5RAP1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CDK5RAP1 Anticuerpo (D-1): sc-398764
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CDK5RAP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407278 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CDK5RAP1 (proteína 1 asociada a la subunidad reguladora de CDK5) es una enzima radical dependiente de S-adenosilmetionina localizada principalmente en las mitocondrias, donde cataliza la modificación posranscripcional de los ARNt mitocondriales, lo que favorece una traducción mitocondrial precisa y la integridad de la cadena respiratoria. Al regular la proteostasis mitocondrial y la capacidad de fosforilación oxidativa, CDK5RAP1 influye en el metabolismo energético celular, el equilibrio redox y las respuestas adaptativas al estrés. La alteración de la actividad de CDK5RAP1 se ha relacionado con una disfunción mitocondrial y se investiga con frecuencia en contextos de reprogramación metabólica, adaptación a la hipoxia y estabilidad del genoma bajo estrés oxidativo. Estas vías convierten a CDK5RAP1 en un objetivo relevante para estudios mecanísticos en biología del cáncer y otros trastornos caracterizados por disfunción mitocondrial.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CDK5RAP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CDK5RAP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CDK5RAP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CDK5RAP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CDK5RAP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CDK5RAP1 para la investigación de la señalización de CDK5RAP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CDK5RAP1 críticos para la función de CDK5RAP1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CDK5RAP1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CDK5RAP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CDK5RAP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CDK5RAP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CDK5RAP1 (h) y el plásmido HDR CDK5RAP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CDK5RAP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CDK5RAP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.