Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) CD42d: sc-404793-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CD42d consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CD42d (h) y el plásmido de doble nickasa CD42d (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GP5. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD42d Anticuerpo (G-11): sc-271662
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CD42d | sc-404793-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CD42d | sc-404793-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GP5 codifica la glicoproteína plaquetaria V (CD42d), un componente del complejo receptor GPIb-IX-V en la superficie de las plaquetas que coopera con la unión al factor von Willebrand para mediar el anclaje plaquetario bajo altas fuerzas de cizallamiento y favorece la activación plaquetaria dependiente de trombina. A través de estas interacciones, CD42d contribuye a la adhesión hemostática, la mecanotransducción y los eventos de señalización posteriores que coordinan la liberación de gránulos plaquetarios y la activación de integrinas. La expresión o función alteradas del complejo GPIb-IX-V se asocian con defectos hereditarios de adhesión plaquetaria y pueden influir en fenotipos trombóticos y hemorrágicos, lo que convierte a GP5 en un locus útil para analizar la biología plaquetaria y los procesos inflamatorios vinculados a la coagulación.
CD42d El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GP5 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GP5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GP5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GP5 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.