CD33 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401011-LAC

Das humane CD33 kodiert ein sialinsäurebindendes, immunglobulinähnliches Lektin (Siglec-3), das überwiegend auf Zellen der myeloischen Linie exprimiert wird und dort als inhibitorischer Rezeptor wirkt, der die Aktivierung der angeborenen Immunantwort prägt. Nach Ligandenbindung signalisiert CD33 über die ITIM-abhängige Rekrutierung von Phosphatasen wie SHP-1/2 und moduliert nachgeschaltete Signalwege einschließlich PI3K/AKT und MAPK, um Zytokinproduktion, Phagozytose und Antigenpräsentation zu regulieren. CD33 wird häufig als Marker der myeloischen Differenzierung verwendet und ist von großer Bedeutung für hämatologische Malignome und die neuroinflammatorische Biologie, einschließlich mikroglialer Programme, die mit dem Alzheimer-Risiko verknüpft sind. Veränderte CD33-Expression oder -Signalgebung kann den „Immune-Checkpoint“-Grundton in myeloischen Zellen verschieben und so inflammatorische Ausgangsniveaus sowie Gewebeumbau beeinflussen.

CD33 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CD33-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD33 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CD33-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD33-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CD33-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.