Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CAD Antibody (G-11): sc-393029. Western blot analysis of CAD expression in Jurkat nuclear extract (A) and NTERA-2 cl.D1 (B) and K-562 (C) whole cell lysates.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CAD双切口酶质粒(h): sc-403028-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CAD 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CAD双切酶质粒（h）和CAD双切酶质粒（h2）编码针对DFFB的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CAD: sc-374067，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CAD双切口酶质粒(h) | sc-403028-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CAD双切口酶质粒(h2) | sc-403028-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DFFB 编码 CAD（caspase 激活的 DNase），这是一种在细胞凋亡过程中负责核小体间 DNA 片段化的内切核酸酶。在健康细胞中，CAD 的活性受其抑制因子 ICAD（DFFA）限制；当 ICAD 发生依赖半胱天冬酶（caspase）的切割后，CAD 被释放出来并切割染色质，从而将凋亡信号与细胞核的解体过程连接起来。该过程与 caspase 级联通路、染色质组织以及濒死细胞的清除相互交织，并常被用作程序性细胞死亡的分子读出指标。CAD 介导的 DNA 片段化若调控异常，已与异常的凋亡表型及基因组完整性缺陷相关，这也支持其在癌症生物学、免疫稳态和神经退行性疾病研究中的重要性。
CAD 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 DFFB 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DFFB内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏DFFB的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了DFFB基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。