非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
CA II 抗体 (D-8): sc-133111. 未转染 293T: sc-117752 (A), 转染 293T: sc-113038 表达载体 (B) 和 HEL 92. 1. 7 (C) 全细胞裂解液中 CA II 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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CA II CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-401059
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CA II CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在CA II基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CA II: sc-48351，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CA II CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-401059 | 20 µg | $397.00 |
概述
碳酸酐酶 II（CA II）由人类 CA2 基因编码，是一种活性很高的细胞质金属酶，可催化 CO₂ 可逆水合生成碳酸氢根和质子，从而调控细胞内 pH、CO₂ 转运以及碳酸氢根的可用性。通过与碳酸氢根转运体及质子处理机制的耦联，CA II 维持多种组织中的酸碱稳态，并参与上皮离子转运、破骨细胞介导的骨吸收以及红细胞气体交换等过程。CA2 的活性还与对 pH 敏感的代谢调控和细胞应激反应相交汇；当碳酸酐酶功能发生改变时，可通过质子动态影响下游信号传导与酶活性。CA2 的遗传或功能扰动与酸碱平衡和矿化异常相关，因此它是研究 pH 依赖性生理过程及疾病相关细胞表型机制的有用靶点。
CA II CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中CA2基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对CA2基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏CA2开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使CA II蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建CA2缺失的细胞模型，用于CA II信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 CA II 功能至关重要的 CA2 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 CA2 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 CA II CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 CA II CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 CA2 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 CA II HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 CA II HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由CA2同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定CA2靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。