Plásmido Doble Nickase (m) BPTF: sc-431488-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)BPTF consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa BPTF (m) y el plásmido de doble nickasa BPTF (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Bptf. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) BPTF | sc-431488-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) BPTF | sc-431488-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Bptf codifica el factor de transcripción con bromodominio y dedo PHD (BPTF), una subunidad central del complejo de remodelación de cromatina NURF que reconoce marcas de histonas y regula el posicionamiento de los nucleosomas para controlar la expresión génica. En células de ratón, BPTF contribuye a programas transcripcionales que gobiernan la proliferación, la especificación de linaje y la organización del patrón del desarrollo, al coordinar la accesibilidad de la cromatina en promotores y potenciadores. A través de su bromodominio y su dedo PHD, BPTF integra señales epigenéticas con redes de factores de transcripción, lo que repercute en procesos como la transcripción dirigida por ADN y la organización de la cromatina. La actividad desregulada de BPTF se ha implicado en estados de cromatina alterados y en salidas transcripcionales aberrantes relevantes para la biología del cáncer y otras enfermedades asociadas a una desregulación epigenética.
BPTF El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Bptf en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Bptf. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Bptf. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Bptf alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.