Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Bob 1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400771
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Bob 1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Bob 1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Bob 1 Anticuerpo (6F10): sc-23932
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Bob 1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400771 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
POU2AF1 (Bob 1/OBF-1) es un coactivador transcripcional restringido a las células B que se une a OCT1/POU2F1 y OCT2/POU2F2 para potenciar la transcripción de genes de inmunoglobulinas y programas más amplios de expresión génica propios de las células B. Favorece las respuestas del centro germinal, la recombinación de cambio de clase y la diferenciación a células plasmáticas al integrar la actividad de potenciadores en motivos octámero con señales que modulan la activación y la supervivencia de las células B. Se ha descrito una expresión desregulada de POU2AF1 y de los circuitos transcripcionales asociados en neoplasias de células B, incluidos linfomas y leucemias, así como en fenotipos inmunitarios vinculados a respuestas humorales alteradas. Por ello, Bob 1 se estudia con frecuencia en vías que controlan la identidad de las células B, la maduración impulsada por antígenos y la regulación transcripcional de genes efectores inmunitarios.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Bob 1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen POU2AF1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del POU2AF1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de POU2AF1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Bob 1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en POU2AF1 para la investigación de la señalización de Bob 1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de POU2AF1 críticos para la función de Bob 1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de POU2AF1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Bob 1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Bob 1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus POU2AF1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Bob 1 (h) y el plásmido HDR Bob 1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología POU2AF1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana POU2AF1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.