Plasmide Double Nickase (h) BMP-8B: sc-404893-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) BMP-8B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BMP-8B Double Nickase (h) et le plasmide BMP-8B Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BMP8B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BMP-8B Antibody (AT13E6): sc-517391
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) BMP-8B | sc-404893-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) BMP-8B | sc-404893-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BMP8B code la protéine morphogénétique osseuse 8B (BMP-8B), un ligand sécrété de la superfamille TGF-β/BMP qui signale via des récepteurs sérine/thréonine kinases de type I/II afin d’activer des programmes transcriptionnels dépendants de SMAD1/5/9. BMP-8B participe à la régulation de la mise en place des plans de développement, de la différenciation tissulaire et de processus associés à la matrice extracellulaire, avec des effets en aval sur les décisions de destin cellulaire et la morphogenèse. En physiologie adulte, l’activité de la voie BMP impliquant BMP8B a été reliée à la régulation du métabolisme et à la biologie du tissu adipeux thermogénique, tandis qu’une dérégulation plus générale de la signalisation BMP est associée à la fibrose, à des anomalies squelettiques et à des phénotypes liés au cancer. Ainsi, BMP8B est souvent étudié pour disséquer la dynamique de la signalisation BMP selon le contexte, l’utilisation des récepteurs et le dialogue (crosstalk) de la voie avec les réseaux MAPK/PI3K dans les cellules humaines.
BMP-8B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BMP8B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BMP8B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BMP8B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BMP8B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.