BMP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402432

概要

BMP1は、分泌性メタロプロテアーゼである骨形成タンパク質1（BMP-1）をコードしており、プロコラーゲンCプロテイナーゼとして機能するほか、細胞外マトリックス（ECM）の成熟に関わる主要酵素の一つです。BMP-1は、プロコラーゲンをはじめとする構造前駆体や他のECM関連タンパク質を切断し、コラーゲン線維形成、組織リモデリング、ならびにマトリックス依存的な細胞シグナル伝達を協調的に制御します。ECMの組み立てとターンオーバーにおける役割を通じて、BMP-1の活性は、結合組織における細胞接着、細胞移動、メカノトランスダクションを制御する経路とも交差します。BMP1機能の破綻は、異常なコラーゲンプロセシングや骨／結合組織の健全性の低下を伴う遺伝性および後天性疾患と関連づけられており、マトリックス生物学や骨格発生の研究において重要な対象となります。

BMP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBMP1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BMP1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BMP1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BMP-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BMP-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BMP1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BMP-1の機能に不可欠なBMP1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BMP1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BMP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBMP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BMP1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BMP-1 HDRプラスミド（h）および BMP-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBMP1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBMP1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。