Partículas Lentivirales de Activación (m) beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β₂-AR: sc-419027-LAC

Adrb2 codifica el receptor β2-adrenérgico de ratón (ADRB2/β2-AR), un receptor acoplado a proteína G que responde a las catecolaminas para regular la señalización cAMP/PKA y los programas transcripcionales posteriores. Más allá del acoplamiento clásico a Gs, ADRB2 participa en la desensibilización dependiente de GRK/β-arrestina, la internalización del receptor y la modulación de la vía MAPK, conectando la señalización aguda con una adaptación celular a más largo plazo. En diversos tejidos, el β2-AR influye en el tono del músculo liso, la regulación cardíaca y metabólica y la señalización de células inmunitarias, lo que convierte a Adrb2 en un nodo clave de las redes de respuesta al estrés. La alteración de la expresión de ADRB2 o de la dinámica de su señalización se ha asociado con hiperreactividad de las vías respiratorias, fenotipos cardiovasculares y biología inflamatoria, lo que respalda estudios mecanísticos en múltiples contextos relevantes para enfermedades.

Las partículas de activación lentiviral beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Adrb2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Adrb2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Adrb2 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.