Plásmido Doble Nickase (h) Bcr: sc-401514-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Bcr consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Bcr (h) y el plásmido de doble nickasa Bcr (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a BCR. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Bcr Anticuerpo (B-12): sc-28375
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Bcr | sc-401514-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Bcr | sc-401514-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BCR codifica Bcr, una proteína multidominio con actividad quinasa de serina/treonina y funciones reguladoras de GTPasas de la familia Rho, que coordina la remodelación del citoesqueleto y la señalización intracelular. Bcr actúa como proteína activadora de GTPasa (GAP) para RAC1 y otras GTPasas pequeñas relacionadas, conectando señales aguas arriba con la dinámica de la actina, la adhesión y los programas de motilidad celular. También contribuye a redes de señalización que modulan la proliferación y las respuestas al estrés mediante interacciones con vías dependientes de fosforilación. La alteración de la función de BCR es biológicamente relevante en contextos de enfermedades hematológicas, en particular a través de eventos de fusión oncogénica que desregulan la señalización de quinasas de tirosina y los programas transcripcionales posteriores.
Bcr El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BCR en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BCR. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BCR. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BCR alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.