Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO BBS4 (h): sc-403421
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- BBS4 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique BBS4, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BBS4 Antibody (1292CT845.130.218): sc-517315
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO BBS4 (h) | sc-403421 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
BBS4 code un composant central du complexe BBSome, qui coopère avec la machinerie de transport intraflagellaire pour réguler l’assemblage du cil primaire et le trafic des protéines membranaires ciliaires. Par son rôle dans la compétence de signalisation ciliaire, BBS4 influence des voies telles que Hedgehog et d’autres programmes médiés par des récepteurs, qui dépendent d’une ciliogenèse intacte et d’une livraison sélective de cargos. Une altération de BBS4 perturbe la fonction du centrosome/du corps basal, compromet la structure ciliaire et modifie les réponses cellulaires aux signaux extracellulaires. Des variants de BBS4 sont associés au syndrome de Bardet–Biedl et à des ciliopathies apparentées, ce qui en fait une cible pertinente pour étudier les mécanismes reliant la dysfonction ciliaire à des phénotypes développementaux et métaboliques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO BBS4 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène BBS4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du BBS4, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert BBS4 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine BBS4.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en BBS4 pour l'étude de la signalisation de BBS4, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de BBS4 essentiels à la fonction de BBS4
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de BBS4 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le BBS4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le BBS4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus BBS4. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le BBS4 plasmide HDR (h) et le BBS4 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie BBS4 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles BBS4 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.