Plásmido Doble Nickase (h) BAF155: sc-400838-NIC

SMARCC1 codifica BAF155, una subunidad estructural central del complejo humano de remodelación de cromatina dependiente de ATP SWI/SNF (BAF), que regula el posicionamiento de los nucleosomas y la accesibilidad de la cromatina. BAF155 contribuye a programas de control transcripcional que gobiernan el compromiso de linaje, la progresión del ciclo celular y las respuestas al daño del ADN mediante interacciones coordinadas con factores de transcripción y reguladores epigenéticos. La alteración de la integridad del complejo SWI/SNF reconfigura los paisajes de potenciadores y promotores, lo que influye en vías como la señalización del desarrollo y el mantenimiento del genoma. Los cambios en la función de SMARCC1/BAF155 y los desequilibrios en subunidades de SWI/SNF se asocian con estados de cromatina desregulados observados en múltiples contextos de cáncer y enfermedades del neurodesarrollo, lo que convierte a SMARCC1 en un nodo útil para estudios mecanísticos de remodelación de cromatina.

BAF155 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SMARCC1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SMARCC1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SMARCC1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SMARCC1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.