Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ATP7B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419260
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ATP7B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ATP7B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ATP7B Anticorpo (A-11): sc-373964
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ATP7B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419260 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene murino Atp7b codifica a ATP7B, uma ATPase do tipo P transportadora de cobre que regula a distribuição intracelular de cobre ao trafegar entre a rede trans-Golgi e compartimentos vesiculares em resposta à carga de cobre. A ATP7B sustenta a maturação de cuproenzimas na via secretória e medeia o sequestro e a exportação de cobre, integrando-se à homeostase celular de metais e às respostas ao estresse oxidativo. A perturbação do manejo de cobre dependente de ATP7B desequilibra o estado redox, o tráfego de proteínas e a função mitocondrial, tornando o Atp7b um nó-chave para o estudo do metabolismo do cobre e da fisiopatologia relacionada. Em camundongos, o Atp7b é amplamente usado para modelar fenótipos genéticos de sobrecarga de cobre e para investigar mecanismos hepáticos e neurológicos ligados à desregulação da homeostase de metais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ATP7B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Atp7b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Atp7b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Atp7b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ATP7B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Atp7b para a investigação da sinalização de ATP7B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Atp7b críticos para a função ATP7B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Atp7b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ATP7B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ATP7B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Atp7b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ATP7B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ATP7B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Atp7b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Atp7b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.