ATP5J Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-419251-LAC
- alvos específicos: mouse
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- ATP5J as Partículas de Ativação Lentiviral (m) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- ATP5J As partículas de ativação lentivirais (m) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo ATP5J Plasmídeo de Ativação Lentiviral (m) e pelo ATP5J Plasmídeo de Ativação Lentiviral (m2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor Atp5j. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ATP5J Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m) | sc-419251-LAC | 200 µl | $455.00 |
Atp5j codifica a ATP5J, uma pequena subunidade acessória da ATP sintase mitocondrial F1F0 (Complexo V) que auxilia a montagem e a estabilidade do holoenzima, necessária para uma fosforilação oxidativa eficiente. Ao contribuir para a produção de ATP e para a manutenção da força próton-motriz mitocondrial, a ATP5J influencia a bioenergética celular, o potencial de membrana mitocondrial e a homeostase redox. A perturbação de componentes do Complexo V pode alterar o fluxo metabólico, elevar as espécies reativas de oxigênio e desencadear respostas compensatórias ao estresse, como a mitofagia e a sinalização integrada de estresse. Como um nó central do metabolismo energético, a ATP5J é relevante para modelos experimentais de disfunção mitocondrial que se cruzam com neurodegeneração, fenótipos cardiometabólicos e remodelamento bioenergético tumoral.
As Partículas de Ativação Lentivirais ATP5J (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Atp5j numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais ATP5J (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Atp5j, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de ATP5J. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Atp5j e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.