Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) ARA70: sc-424185-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)ARA70 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ARA70 (m) y el plásmido de doble nickasa ARA70 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ncoa4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ARA70 Anticuerpo (C-4): sc-373739
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) ARA70 | sc-424185-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Ncoa4 de ratón codifica ARA70, un coactivador de receptores nucleares que modula la transcripción dependiente de ligando al interactuar con el receptor de andrógenos y complejos relacionados de receptores nucleares. ARA70 influye en programas transcripcionales asociados a la cromatina que regulan la proliferación, la diferenciación y el metabolismo celulares, integrando señales entre vías de hormonas esteroideas y de correadores (co-reguladores). NCOA4 también participa en la homeostasis del hierro a través de la ferritinofagia, al asociarse con la maquinaria de autofagia dirigida por NCOA4 para llevar la ferritina a los lisosomas, conectando la biología de los receptores nucleares con la autofagia y las respuestas al estrés oxidativo. La desregulación de estos procesos se ha asociado con alteraciones en la señalización hormonal, vulnerabilidad celular dependiente del hierro y fenotipos relevantes para contextos de investigación en biología del cáncer y neurodegeneración.
ARA70 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ncoa4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ncoa4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ncoa4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ncoa4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.