Aquaporin 9/AQP9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401298

Descripción general

AQP9 codifica la acuaporina 9, un canal de la membrana plasmática del tipo acuagliceroporina que facilita el transporte bidireccional de agua y de pequeños solutos como el glicerol, la urea y otros metabolitos neutros. Al regular el flujo de glicerol, AQP9 influye en el balance energético celular y en el metabolismo lipídico, apoyando procesos como la gluconeogénesis y la homeostasis osmótica en tejidos con alta actividad metabólica. En contextos inmunitarios y epiteliales, se ha vinculado la actividad alterada de AQP9 con cambios en la función de las células inflamatorias y en la fisiología de barrera, conectando su expresión con vías que acoplan el transporte de membrana con respuestas metabólicas y al estrés. Se ha informado de una expresión desregulada de AQP9 en múltiples contextos relevantes para la enfermedad, incluidos trastornos metabólicos y fenotipos asociados al cáncer, donde el transporte de solutos puede modular programas de proliferación y supervivencia.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 9/AQP9 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen AQP9 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del AQP9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de AQP9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Aquaporin 9/AQP9.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en AQP9 para la investigación de la señalización de Aquaporin 9/AQP9, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de AQP9 críticos para la función de Aquaporin 9/AQP9
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de AQP9 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Aquaporin 9/AQP9 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Aquaporin 9/AQP9 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus AQP9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Aquaporin 9/AQP9 (h) y el plásmido HDR Aquaporin 9/AQP9 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología AQP9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana AQP9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.