Aquaporin 7/AQP7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419178

Descripción general

Aqp7 codifica la acuaporina 7 (AQP7), una acuagliceroporina que facilita el transporte a través de la membrana de agua y pequeños solutos neutros como el glicerol. En adipocitos de ratón, AQP7 ayuda a regular la salida de glicerol durante la lipólisis, influyendo en la utilización del glicerol, el almacenamiento de triglicéridos y el equilibrio energético sistémico. Su actividad se integra con programas de señalización metabólica, incluidas las vías lipolíticas impulsadas por cAMP/PKA y redes más amplias de homeostasis lipídica. Alteraciones en la expresión o la función de AQP7 se han asociado con fenotipos relevantes para la obesidad, la resistencia a la insulina y la acumulación de lípidos hepáticos, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en modelos de enfermedad metabólica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 7/AQP7 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Aqp7 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Aqp7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Aqp7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Aquaporin 7/AQP7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Aqp7 para la investigación de la señalización de Aquaporin 7/AQP7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Aqp7 críticos para la función de Aquaporin 7/AQP7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Aqp7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Aquaporin 7/AQP7 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Aquaporin 7/AQP7 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Aqp7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Aquaporin 7/AQP7 (m) y el plásmido HDR Aquaporin 7/AQP7 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Aqp7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Aqp7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.