Plásmido Doble Nickase (h) Aquaporin 3/AQP3: sc-400636-NIC

AQP3 codifica la acuaporina-3, un canal de membrana que facilita el transporte transcelular de agua, glicerol y otros solutos pequeños, influyendo así en la regulación del volumen celular, la homeostasis osmótica y el metabolismo celular. Gracias a su permeabilidad al glicerol, AQP3 conecta el transporte de membrana con el balance energético y con procesos relacionados con el estado redox que afectan a la proliferación, la migración y las respuestas al estrés en contextos epiteliales e inmunitarios. La expresión y la localización de AQP3 se estudian en tejidos de barrera como la piel y las mucosas, donde una actividad alterada del canal puede modular la hidratación y la señalización inflamatoria. La desregulación de AQP3 se ha asociado con remodelado patológico y con la biología tumoral, lo que lo convierte en una diana útil para estudios mecanísticos sobre señalización impulsada por el transporte y fenotipos relevantes para la enfermedad.

Aquaporin 3/AQP3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus AQP3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de AQP3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de AQP3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con AQP3 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.