Partículas Lentivirales de Activación (h) Aquaporin 1/AQP1: sc-400340-LAC

El gen humano **AQP1** codifica la **acuaporina 1**, un canal de agua tetramérico de membrana que permite un rápido transporte osmótico de agua a través de las membranas plasmáticas y de barreras especializadas. AQP1 contribuye a la homeostasis de líquidos y a la permeabilidad microvascular, y se integra con procesos como el transporte endotelial, la regulación del volumen celular y el equilibrio de fluidos en los tejidos. Más allá del flujo de agua, AQP1 se ha asociado en determinados contextos con la migración celular y comportamientos angiogénicos, vinculando la actividad del canal con la dinámica del citoesqueleto y las interacciones con el microambiente extracelular. Se ha descrito una expresión o localización desregulada de AQP1 en trastornos que implican un manejo anómalo de fluidos y alteraciones de la función de barrera vascular, lo que respalda su utilidad como diana de investigación en biología relacionada con el edema, fisiología renal y pulmonar, y estudios del microambiente tumoral.

Las partículas de activación lentiviral Aquaporin 1/AQP1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de AQP1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Aquaporin 1/AQP1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción AQP1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Aquaporin 1/AQP1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo AQP1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.