Aquaporin 1/AQP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400340

Descripción general

AQP1 codifica la acuaporina-1, un canal de agua de membrana tetramérico que permite un transporte osmótico rápido de agua a través de las membranas plasmáticas y contribuye a la homeostasis de los fluidos. En contextos endoteliales y epiteliales, AQP1 influye en la permeabilidad transcelular al agua, la regulación del volumen celular y la dinámica del microambiente, en interacción con el transporte de iones y la remodelación del citoesqueleto. Se ha asociado la expresión y localización alteradas de AQP1 con la biología vascular, procesos relacionados con el edema y la angiogénesis asociada a tumores, así como con fenotipos de motilidad celular. Como canal de membrana de estudio accesible, AQP1 se investiga con frecuencia para vincular el flujo de agua con la función de barrera, la migración y las respuestas al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 1/AQP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen AQP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del AQP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de AQP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Aquaporin 1/AQP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en AQP1 para la investigación de la señalización de Aquaporin 1/AQP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de AQP1 críticos para la función de Aquaporin 1/AQP1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de AQP1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Aquaporin 1/AQP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Aquaporin 1/AQP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus AQP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Aquaporin 1/AQP1 (h) y el plásmido HDR Aquaporin 1/AQP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología AQP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana AQP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.