Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Angiotensinogen Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419047
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Angiotensinogen El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Angiotensinogen, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Angiotensinogen Anticuerpo (H-12): sc-374511
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Angiotensinogen Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419047 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen Agt de ratón codifica el angiotensinógeno, una glucoproteína secretada derivada del hígado que actúa como precursor de los péptidos de angiotensina dentro del sistema renina–angiotensina (SRA). El procesamiento proteolítico por la renina y la enzima convertidora de angiotensina genera angiotensinas bioactivas que regulan el tono vascular, la homeostasis de sodio y líquidos y la señalización endocrina en el riñón, la glándula suprarrenal, el corazón y el cerebro. La actividad del SRA mediada por el angiotensinógeno se cruza con vías de inflamación y estrés oxidativo e influye en la remodelación tisular y la fibrosis a través de la señalización de la angiotensina II. La desregulación de la expresión o el procesamiento de Agt se utiliza ampliamente como punto de entrada mecanístico para estudiar la fisiopatología cardiovascular y renal, las respuestas al estrés metabólico y la comunicación entre órganos en modelos murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Angiotensinogen (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Agt en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Agt junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Agt tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Angiotensinogen.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Agt para la investigación de la señalización de Angiotensinogen, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Agt críticos para la función de Angiotensinogen
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Agt para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Angiotensinogen CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Angiotensinogen CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Agt. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Angiotensinogen (m) y el plásmido HDR Angiotensinogen (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Agt para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Agt definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.