Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
ALPPL2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-401492-KO-2
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ALPPL2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ALPPL2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ALPPL2 Anticuerpo (9-YD35): sc-134255
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ALPPL2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-401492-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ALPPL2 codifica la fosfatasa alcalina tipo placentario 2, una ectoenzima anclada a glicosilfosfatidilinositol (GPI) que hidroliza monoésteres de fosfato en la superficie celular. Al regular la desfosforilación de sustratos extracelulares, ALPPL2 puede influir en la disponibilidad local de fosfato, la señalización en microdominios de membrana y programas asociados a la diferenciación, particularmente en contextos epiteliales y relacionados con células germinales. Su expresión se utiliza con frecuencia como marcador de estados de desarrollo específicos, y se han descrito alteraciones en la expresión de ALPPL2 en múltiples conjuntos de datos relacionados con el cáncer. Estas características hacen que ALPPL2 sea relevante para estudios de identidad celular, biología de enzimas de superficie y remodelación de vías durante la transformación.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ALPPL2 (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ALPPL2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ALPPL2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ALPPL2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ALPPL2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ALPPL2 para la investigación de la señalización de ALPPL2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ALPPL2 críticos para la función de ALPPL2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ALPPL2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ALPPL2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ALPPL2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ALPPL2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ALPPL2 (h) y el plásmido HDR ALPPL2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ALPPL2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ALPPL2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.