Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Akt1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400014-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Akt1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Akt1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Akt1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AKT1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Akt1 Anticorpo (G-5): sc-55523
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Akt1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400014-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Akt1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400014-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AKT1 codifica a quinase de serina/treonina Akt1, um efetor central da sinalização de PI3K que integra sinais de fatores de crescimento e de insulina para regular a sobrevivência celular, a proliferação, o metabolismo e a síntese proteica. A Akt1 fosforila diversos substratos que controlam a apoptose, a progressão do ciclo celular e a tradução mediada por mTORC1, além de coordenar respostas celulares ao estresse oxidativo e à disponibilidade de nutrientes. A desregulação da sinalização de AKT1 está associada à transformação oncogênica e à resistência a terapias, e alterações na atividade de Akt1 também foram implicadas em fenótipos metabólicos e do neurodesenvolvimento. Em células humanas, as perturbações da via de AKT1 são frequentemente estudadas no contexto da ativação de receptores tirosina-quinase, da perda de PTEN e de nós de sinalização a jusante como FOXO, GSK3 e TSC2.
Akt1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AKT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AKT1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AKT1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AKT1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.