ADHγ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402261-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ADHγO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ADHγ (h) e o Plasmídeo Double Nickase ADHγ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADH1C. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADHγ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402261-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ADHγ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402261-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O ADH1C codifica a álcool desidrogenase humana gama (ADHγ), uma oxidorredutase citosólica dependente de zinco que catalisa a oxidação dependente de NAD⁺ do etanol e de outros álcoois alifáticos aos seus aldeídos correspondentes. Como parte do cluster de genes ADH, a ADHγ contribui para o metabolismo hepático e gastrointestinal de xenobióticos e influencia o balanço redox celular por meio da produção de NADH. Variações ou alterações na regulação do ADH1C podem modular a exposição ao acetaldeído e, a jusante, o estresse oxidativo e as vias de desintoxicação de aldeídos, ligando essa enzima a fenótipos de suscetibilidade em lesão tecidual relacionada ao álcool e a uma desregulação metabólica mais ampla. O ADH1C também é usado como marcador funcional em estudos de diferenciação de hepatócitos, metabolismo hepático e cinética enzimática entre isoformas de ADH.
ADHγ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADH1C em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADH1C. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADH1C. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADH1C interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.