Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418996

Descripción general

Adcy6 codifica la adenilato ciclasa 6 (AC6/ADCY6), una enzima asociada a la membrana que convierte ATP en AMPc aguas abajo de la señalización mediada por receptores acoplados a proteínas G. Al modular la dinámica del AMPc, AC6 regula programas de fosforilación dependientes de PKA y de EPAC que influyen en la actividad de canales iónicos, el control metabólico y las respuestas transcripcionales dependientes del estímulo. En tejidos de ratón, ADCY6 se vincula comúnmente a vías β-adrenérgicas y a otras rutas acopladas a Gs que coordinan la contractilidad cardíaca, el tono del músculo liso de las vías respiratorias y el manejo renal de sal y agua. La desregulación de la señalización del AMPc que involucra a ADCY6 se ha asociado con fenotipos relevantes en el ámbito cardiopulmonar y renal, lo que respalda su uso en estudios mecanísticos sobre la integración de señales de GPCR y la homeostasis de segundos mensajeros.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adcy6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adcy6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adcy6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adcy6 para la investigación de la señalización de Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Adcy6 críticos para la función de Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adcy6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adcy6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 (m) y el plásmido HDR Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adcy6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adcy6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.