Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-400407-KO-2

Descripción general

ADCY3 codifica la adenilato ciclasa 3 (AC3), una enzima asociada a la membrana que convierte el ATP en AMPc cíclico, moldeando así la señalización de segundos mensajeros aguas abajo de diversos receptores acoplados a proteína G. Al regular los niveles intracelulares de AMPc, AC3 influye en vías dependientes de PKA y EPAC que controlan programas transcripcionales, la actividad de canales iónicos y respuestas metabólicas celulares. AC3 se ha estudiado ampliamente en contextos sensoriales y neuroendocrinos y contribuye a la señalización en microdominios de AMPc que ajusta el acoplamiento estímulo–respuesta. La evidencia genética y funcional vincula la señalización asociada a ADCY3 con fenotipos metabólicos y rasgos neuroconductuales, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de la regulación impulsada por AMPc en células humanas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ADCY3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ADCY3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ADCY3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ADCY3 para la investigación de la señalización de Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ADCY3 críticos para la función de Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ADCY3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ADCY3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 (h) y el plásmido HDR Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ADCY3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ADCY3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.