ADAM22 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418988
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ADAM22 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ADAM22, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ADAM22 Anticuerpo (C-2): sc-373931
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ADAM22 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418988 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Adam22 codifica ADAM22, una proteína transmembrana de la familia ADAM catalíticamente inactiva, enriquecida en el sistema nervioso, que funciona como componente de adhesión/andamiaje en las sinapsis. ADAM22 forma complejos con LGI1 y receptores postsinápticos para regular la transmisión glutamatérgica, la maduración sináptica y la excitabilidad neuronal, influyendo en la organización de las espinas dendríticas y la estabilidad de los circuitos. A través de estas interacciones, ADAM22 afecta vías de señalización sináptica y la plasticidad dependiente de la actividad, que son centrales para el neurodesarrollo y la homeostasis de las redes. La desregulación del eje ADAM22–LGI1 se ha vinculado con la susceptibilidad a convulsiones y fenotipos del neurodesarrollo, lo que convierte a Adam22 en una diana útil para estudios mecanísticos de la disfunción sináptica en modelos relevantes para enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ADAM22 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adam22 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adam22 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adam22 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ADAM22.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adam22 para la investigación de la señalización de ADAM22, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Adam22 críticos para la función de ADAM22
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adam22 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ADAM22 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ADAM22 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adam22. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ADAM22 (m) y el plásmido HDR ADAM22 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adam22 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adam22 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.