ADAM12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418983
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ADAM12 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ADAM12, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ADAM12 Anticorpo (1G3): sc-293225
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADAM12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418983 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ADAM12 (uma desintegrina e metaloproteinase 12) é uma protease ancorada à membrana e reguladora de adesão que modula a remodelação da matriz extracelular, a sinalização de fatores de crescimento e as interações célula–célula. Em tecidos de camundongo, o ADAM12 contribui para o “shedding” proteolítico de proteínas da superfície celular e influencia vias associadas à miogênese, fibrose e remodelação estromal, incluindo processos relacionados a EGFR e TGF-β. Sua atividade afeta a migração celular, a diferenciação e a mecanotransdução ao alterar a composição da MEC e a disponibilidade de receptores. A expressão ou atividade desregulada de ADAM12 tem sido associada à remodelação patológica de tecidos e a fenótipos ligados à inflamação, tornando-o relevante para o estudo de mecanismos de doença em contextos musculoesqueléticos e fibróticos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ADAM12 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adam12 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adam12, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adam12 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ADAM12.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adam12 para a investigação da sinalização de ADAM12, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adam12 críticos para a função ADAM12
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adam12 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ADAM12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ADAM12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adam12. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ADAM12 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ADAM12 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adam12 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adam12 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.