Partículas Lentivirales de Activación (h) ACADVL (VLCAD): sc-403111-LAC

ACADVL codifica la acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga (VLCAD), una flavoproteína mitocondrial que cataliza el primer paso de deshidrogenación en la β-oxidación de acil-CoA de ácidos grasos de cadena larga. VLCAD sostiene la producción de energía a partir de ácidos grasos, contribuyendo al equilibrio redox mitocondrial y a la flexibilidad metabólica en tejidos con alta demanda oxidativa, como el corazón y el músculo esquelético. La alteración o reducción de la actividad de ACADVL se asocia con una oxidación deficiente de ácidos grasos de cadena larga, perfiles de acilcarnitinas modificados y respuestas de estrés mitocondrial. Estos defectos metabólicos se estudian en el contexto de trastornos hereditarios de la oxidación de ácidos grasos y en investigaciones más amplias sobre disfunción cardiometabólica y mecanismos de enfermedades mitocondriales.

Las partículas de activación lentiviral ACADVL (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de ACADVL en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral ACADVL (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción ACADVL, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de ACADVL. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo ACADVL y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.