β3Gn-T3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-411457-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- β3Gn-T3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase β3Gn-T3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase β3Gn-T3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para B3GNT3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
β3Gn-T3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-411457-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
β3Gn-T3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-411457-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
B3GNT3 codifica a glicosiltransferase humana β3Gn-T3, uma enzima localizada no complexo de Golgi que catalisa a transferência de N-acetilglicosamina ligada em β1,3 para glicanos aceitadores, a fim de estender estruturas de poli-N-acetillactosamina em glicoproteínas e glicolipídios. Por meio da regulação da elaboração de N- e O-glicanos, a β3Gn-T3 contribui para a maturação de glicoproteínas, a ligação a lectinas e as interações célula–célula ou célula–matriz que influenciam a adesão e a sinalização. Alterações na expressão ou na atividade de B3GNT3 têm sido associadas a mudanças nos padrões de glicosilação relatadas em múltiplos contextos patológicos, incluindo remodelação de glicanos associada a tumores e processos relacionados ao sistema imune. Como resultado, B3GNT3 é frequentemente estudado em fluxos de trabalho de glicobiologia que investigam redes de glicosilação no Golgi, tráfego de receptores e interações com a matriz extracelular.
β3Gn-T3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus B3GNT3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de B3GNT3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função B3GNT3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com B3GNT3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.