Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) α2B-AR: sc-403430-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)α2B-AR consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa α2B-AR (h) y el plásmido de doble nickasa α2B-AR (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ADRA2B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: α2B-AR Anticuerpo (G-9): sc-390430
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) α2B-AR | sc-403430-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) α2B-AR | sc-403430-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADRA2B codifica el receptor adrenérgico humano alfa2B (α2B-AR), un GPCR acoplado a Gi/o que responde a las catecolaminas para modular la actividad de la adenilil ciclasa, el AMPc intracelular y la señalización downstream dependiente de PKA. La activación del receptor también puede involucrar las vías MAPK/ERK y las asociadas a PI3K mediante mecanismos dependientes de la proteína G y de la β-arrestina, dando forma a respuestas celulares como la liberación de neurotransmisores, la contractilidad del músculo liso y el tono vascular. En contextos inmunitarios y metabólicos, la señalización de α2B-AR influye en programas transcripcionales sensibles al estrés y en el crosstalk con otros receptores neuromoduladores. Se han investigado variaciones genéticas y de expresión en ADRA2B en relación con fenotipos neuroconductuales y la regulación cardiovascular, lo que respalda su relevancia para estudios mecanísticos de redes de señalización adrenérgica.
α2B-AR El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ADRA2B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ADRA2B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ADRA2B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ADRA2B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.