α2A-AR Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419023
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- α2A-AR El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico α2A-AR, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
α2A-AR Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419023 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Adra2a codifica el receptor adrenérgico α2A (α2A-AR) del ratón, un receptor acoplado a Gi/Go que responde a la noradrenalina y la adrenalina para inhibir la adenilil ciclasa y reducir el AMPc intracelular. A través de la señalización mediada por GPCR, el α2A-AR modula la actividad de canales iónicos, la liberación presináptica de neurotransmisores y programas de fosforilación dependientes de PKA aguas abajo que moldean la transmisión sináptica y la excitabilidad neuronal. En tejidos periféricos, el α2A-AR contribuye a la regulación del tono simpático y de las respuestas celulares controladas por catecolaminas. La señalización adrenérgica desregulada que involucra a ADRA2A se ha vinculado a fenotipos neuroconductuales y a rasgos cardiometabólicos, lo que hace que este receptor sea relevante para estudios sobre la regulación del eje del estrés y la fisiología autonómica.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO α2A-AR (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adra2a en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adra2a junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adra2a tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína α2A-AR.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adra2a para la investigación de la señalización de α2A-AR, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Adra2a críticos para la función de α2A-AR
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adra2a para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido α2A-AR CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido α2A-AR CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adra2a. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR α2A-AR (m) y el plásmido HDR α2A-AR (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adra2a para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adra2a definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.