CIB3 puede iniciar una serie de eventos de señalización intracelular a través de diversos mecanismos. El cloruro cálcico, por ejemplo, introduce iones de calcio que se unen directamente al dominio EF-hand de CIB3, un motivo conocido para la coordinación de iones de calcio. Esta unión provoca un cambio en la conformación de la proteína, lo que le permite participar activamente en las vías de señalización celular. Del mismo modo, la ionomicina, como ionóforo del calcio, eleva los niveles de calcio intracelular que pueden unirse a la CIB3, provocando potencialmente cambios estructurales que activan sus funciones de señalización. Thapsigargin también desempeña un papel en el aumento de la concentración de calcio citosólico, que podría interactuar con CIB3, dando lugar a su activación a través de cambios conformacionales inducidos por el calcio. Además, BAY K8644, al activar los canales de calcio de tipo L, eleva el calcio intracelular, lo que podría conducir a la activación de CIB3.
Otros activadores químicos influyen en la CIB3 a través de diferentes mecanismos. El sulfato de cinc y el sulfato de magnesio suministran iones de cinc y magnesio, respectivamente, que pueden interactuar con la proteína, dando lugar posiblemente a modificaciones estructurales que potencian la actividad funcional de la CIB3. El forbol 12-miristato 13-acetato y el 4-α-forbol 12,13-didecanoato, ambos ésteres de forbol, imitan al diacilglicerol y activan la proteína cinasa C (PKC). La PKC, a su vez, puede fosforilar la CIB3, lo que conduce a su activación. La forskolina aumenta los niveles de AMPc en el interior de la célula, activando la proteína cinasa A (PKA), que puede dirigirse a la CIB3 para su fosforilación, y el N6-benzoiladenosina-3',5'-monofosfato cíclico, un análogo del AMPc, también activa la PKA, culminando potencialmente en la fosforilación de la CIB3. El fluoruro de sodio actúa como agente fosforilante, lo que podría conducir a la fosforilación directa de CIB3, alterando sus capacidades de señalización. Por último, el 1,2-dioctanoil-sn-glicerol, un análogo sintético del DAG, activa la PKC, que podría fosforilar la CIB3, modulando así su papel en las vías de señalización celular.
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