Neutralização de Peptídeos

• Peptídeos Bloqueadores (neutralizadores) estão disponíveis como controle negativos para todos os anticorpos da Santa Cruz Biotecnologia, Inc. Tais como, anticorpos policlonais purificados por afinidade de coelhos e cabras e anticorpos monoclonais produzidos contra peptídeos antígenos. O anticorpo que se liga a um peptídeo pode bloquear/competir via pré-absorção com o peptídeo bloqueador.
• Determine a diluição máxima do anticorpo na qual os resultados positivos sejam consistentemente alcançados para o ensaio desejado. Por exemplo, recomenda-se H-Ras (259) para imunoprecipitação em 1 µg/ml mas é positivo na diluição de 50 ng/ml.
• Para bloquear/competir, combine o anticorpo (na concentração determinada pelo método previamente mencionado) com 5 vezes de excesso (em peso) do peptídeo bloqueador em um pequeno volume (500 µl) de PBS (Soluções-tampão e Soluções Gerais). Incube por até 2 horas em temperatura ambiente ou durante a noite à temperatura de 4° C.
• Após bloquear/competir, dilua a mistura anticorpo/peptídeo na solução-tampão apropriada e prossiga com a devida aplicação em pesquisa.