Plásmido Doble Nickase (h) ZDHHC20: sc-406353-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ZDHHC20 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ZDHHC20 (h) y el plásmido de doble nickasa ZDHHC20 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ZDHHC20. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ZDHHC20 Anticuerpo (A-4): sc-518217
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ZDHHC20 | sc-406353-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ZDHHC20 | sc-406353-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZDHHC20 codifica una palmitoiltransferasa de la familia DHHC que cataliza la S-palmitoilación de sustratos proteicos, regulando su asociación a membranas, el tráfico subcelular y la estabilidad de proteínas de señalización. Mediante el control dinámico de esta modificación lipídica, ZDHHC20 influye en procesos como la señalización de receptores, el transporte vesicular y la organización de microdominios de membrana que moldean las vías aguas abajo. Los programas de palmitoilación alterados en los que participa ZDHHC20 se han asociado con fenotipos de crecimiento y migración celular desregulados, y se han estudiado en el contexto de la biología del cáncer y otros trastornos en los que se ve comprometida la fidelidad de la señalización de membrana. En consecuencia, ZDHHC20 es una diana útil para estudiar cómo la localización proteica dependiente de la palmitoilación afecta la transducción de señales y la homeostasis celular en modelos humanos.
ZDHHC20 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ZDHHC20 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ZDHHC20. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ZDHHC20. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ZDHHC20 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.